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DNAの電気泳動（1kb以上）

使用例 1

DNAの電気泳動（1kb以上）

試薬	10×TAE、Agarose、Ethidium bromide、Bromophenol blue、Xylenecyanol FF、Glycerol
方法	EB溶液作製	Ethidium bromideを0.5mg/mlになるように溶解させ、冷暗所で保存します。
	色素マーカー	0.25% Bromophenol blue、0.25% Xylenecyanol FF、30% Glycerol になるように溶解させます。

ゲルの作製

1. 目的とするDNAに適した量（下記参照）のAgaroseを入れます。
2. 10mlの10×TAEを入れ、全量100mlになるように精製水を入れます。
3. 電子レンジなどで加温し、Agaroseを溶解させます。
   注：突沸する恐れがあるので注意します。また溶け残りがないことを確認します。
4. 液温が６０℃程度に下がったら、0.5μg/mlになるように前もって作製したEB溶液を添加します。
5. 電気泳動ゲルの型からゲルが流れ落ちないように、テープで型の両端を貼ります。
   （Agarose溶液を入れた時、漏れないようにパスツールピペットでテープと型との境目をAgarose溶液でシールします。）
6. コームを差し、境目のAgaroseが固定したら、残りのAgarose溶液を型に流し込みます。
7. 固化したことを確認した後、コームを静かに引き抜き、テープを剥がします。

Agarose濃度と有効な分離能の得られるDNAの関係

Agarose（%）	DNA（kb）
0.3	60～5
0.6	20～1
0.7	10～0.8
0.9	7～0.5
1.2	6～0.4
1.5	4～0.2
2	3～0.1

電気泳動

1. 電気泳動の泳動バッファーも10×TAEを用いる。10×TAE 100ml を精製水で1Lにします。
2. 作製したゲルを泳動槽に装着し、泳動バッファーを流し込みます。
3. サンプルと色素マーカーを5：1の割合で混和し、ゲルのスロットに注入します。
4. 定電圧で電気泳動を実行します。
5. 色素の泳動距離を目安にし泳動を終えます。
6. DNAのバンドの確認はUVを照射して行います。

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