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DNAの電気泳動（1kb以下）

使用例2

DNAの電気泳動（1kb以下）

試薬	10×TBE、Acrylamide、N,N'-Methylene-bisacrylamide、Ammonium peroxodisulfate、Ethidium bromide、Bromophenol blue、Xylenecyanol FF、Glycerol
方法	EB溶液作製	Ethidium bromideを0.5mg/mlになるように溶解させ、冷暗所で保存します。
	色素マーカー	0.25% Bromophenol blue、0.25% Xylenecyanol FF、30% Glycerol になるように溶解させます。

ゲルの作製　(12% Acrylamide の場合)

1. 0% Acrylamide溶液
   29gのAcrylamide,monomerと1gのN,N'-Methylene-bisacrylamideを精製水100mlに溶解させ、ストック溶液として冷蔵保存します。
2. 10% Ammonium peroxodisulfate溶液
   精製水で10%溶液を調製します。用時調製してください。
3. スラブ電気泳動用のガラス板をよく洗浄しておき、組み立てておきます。
4. 30% Acrylamide溶液40ml、10% Ammonium peroxodisulfate溶液0.5ml、10×TBE 10mlを添加し、精製水で全量100mlにします。
5. 0.5mg/mlになるように前もって作製したEB溶液を添加します。
6. TEMED 15μｌを添加し、電気泳動の型に流し込みます。
7. コームを差し、室温に放置し、固化させます。固化したことを確認した後、コームを静かに引き抜きます。

Acrylamide濃度と有効な分離能の得られるDNAの関係

Acrylamide（%）	DNA
3.5	100～1000
5.0	80～500
8.0	60～400
12.0	20～200
20.0	10～100

電気泳動

1. 電気泳動の泳動バッファーも10×TBEを用いる。10×TBE 100ml を精製水で1Lにします。
2. 作製したゲルを泳動槽に装着し、泳動バッファーを流し込みます。
3. サンプルと色素マーカーを5：1の割合で混和し、ゲルのスロットに注入します。
4. 定電圧で電気泳動を実行します。
5. 色素の泳動距離を目安にし泳動を終えます。
6. DNAのバンドの確認はUVを照射して行います。

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